Panelabhängige Allergene sind auf einer Nitrocellulose-Membranen aufgebracht. Bei der Testdurchführung wird eine verdünnte Patientenprobe (Serum oder Plasma) dem Teststreifen in der Inkubationswanne zugegeben. Spezifische IgE-Antikörper der Probe binden während der Inkubation an die aufgetragenen Antigene der Membran; nicht gebundene Komponenten aus Serum oder Plasma werden nach der Inkubation weggespült. Anschließend wird ein Digoxigenin anti-human IgE-Antikörper, gekoppelt mit Meerrettichperoxidase, zugegeben und bindet an die IgE-Antikörper von Probe und Standards.

Das zugefügte Farbreagenzes TMB (3,3‘,5,5‘-Tetramethylbenzidin) wird durch einen an Meerrettichperoxidase-gekoppelten anti-IgE Antikörper in einen dunklen Farbstoff umgewandelt. Die jeweilige Intensität korreliert mit der Konzentration an gebundenen Antikörper. Die Reaktion wird durch Zugabe einer Stopp-Lösung beendet und die ermittelten Konzentrationswerte [kU/L] können der jeweiligen Intensität zugeordnet werden.

Die Standards sind gemäß dem WHO-Referenzserum 75/5021 kalibriert. Die identifizierten Units/mL können den jeweiligen CAP-Klassen zugeordnet werden und stellen die Stufe der spezifischen IgE-Sensibilisierung dar (siehe Tabelle unten).